
双靶点CAR-T的脱靶检测可采用多种方法,包括MPA试验、组织交叉反应(TCR)和体外细胞杀伤试验等。其中,以MPA试验为例,其检测流程需根据双CAR的结构策略来进行抗体的合成和开展MPA试验。原则上,用于MPA检测的抗体应尽量反映T细胞表面表达的CAR真实结构。
例如,如果双CAR是串联在一起的,即它们形成了一个二价串联抗原识别结构,那么可以合成一个类似的二价串联抗体进行MPA检测,来评估CAR-T对不同抗原的特异性结合能力,从而判断其是否存在脱靶效应。如果双CAR是分开的,那么需要分别针对每个靶点分别合成含有CAR结构的抗体,并进行两个独立的MPA检测。