【云回顾】病理研究之细节决定TCR试验的成败

1、什么是TCR？

组织交叉反应（Tissue Cross-Reactivity，TCR）是指在体外检测抗体药物与组织中抗原表位结合的试验。其目的是确认受试抗体是否与药效靶组织的抗原表位结合，并检测抗体是否与非靶部位组织的抗原发生结合。这一过程为确定非临床安全性试验中的相关动物种属，以及预测可能的毒性靶器官提供参考。

2、为什么要做TCR？

抗体药物具有免疫特性，除了与目标抗原结合外，如果人体正常组织中存在相同或相似的抗原表位，抗体也可能与非靶器官的其他组织细胞结合，从而引发严重的不良反应。

因此，进行TCR试验是抗体药物临床前安全性评价的重要组成部分，对于抗体药物的研发至关重要，也是国内外监管机构的要求。

3、TCR试验的核心技术是什么？

免疫组织化学技术（IHC，Immunohistochemistry）是TCR试验的核心技术。该技术采用冰冻或固定组织标本，切片后用带有显色剂标记的特异性抗体，通过抗原-抗体反应和组织化学的显色反应，对组织进行染色，从而定性、定位和定量地测定相应抗原。

4、试验所需的人体器官组织来源有哪些？

人体器官组织可通过以下途径获得：捐献人体组织、手术切取组织、胎盘组织、细胞系以及商业化的人体组织芯片。

5、如何正确的处理新鲜的组织？

新鲜组织应立即进行冰冻处理，不建议使用化学固定法。冰冻过程中要注意迅速冷冻，避免缓慢冷冻或反复冻融，因为这样会在组织中形成冰晶，破坏组织结构，进而影响后续试验的观察效果。

6、如何判断我的病理切片是否封闭好了？

可以使用抗转铁蛋白受体抗体对组织切片进行染色。如果切片中的血细胞呈淡黄褐色，则说明切片封闭已经完成。

7、在组化染色时，何时选择一步法（直接法）？

一步法（直接法）是将生物素标记物与一抗偶联，通过一步免疫组化反应完成染色的方法。此法避免了二抗引起的非特异性染色，减少了干扰。然而，由于一抗与生物素结合，可能会破坏一抗的空间结构，特别是抗体与抗原结合位点，从而导致假阴性或假阳性结果。

8、TCR试验中经常会遇到哪些问题？

• 假阳性/假阴性

• 脱片

• 非特异性染色

• 边缘效应

• “阴阳脸”

• 。。。

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