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新闻资讯

siRNA一体化解决方案:从设计到体外药效评估,加速RNAi药物研发

2026-04-17
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访问量:

美迪西 siRNA 体外筛选平台致力于推动 RNA 干扰研究、加速药物发现进程。依托先进工具与成熟方法学,平台提供从 siRNA 设计到体外药效评估的一体化解决方案。

siRNA 设计

美迪西采用先进的工具和方案来设计高效、低脱靶效应的siRNA序列:

美迪西赋能您的 RNAi 研究.webp

siDirect(siRNA 设计)算法

通过整合跨物种的序列比对结果,提高靶向准确性。

多态性和保守性分析

确保对人类、小鼠、大鼠和其他类似物均有效。

先进的在线与人工工具

结合 SNP 和组织特异性表达数据,用于定制 siRNA 序列。

脱靶预测

通过序列比对与错配评分系统,降低非特异性作用风险。

案例研究:开发一种高效的siRNA候选物,用于有效敲低人细胞中的抗凝血酶III(ATIII)表达。

研究方法:结构化的六步设计和验证工作流程:

1、序列比对

确保了特异性和靶点匹配

序列比对.webp

2、模拟分析

比较序列变体以进行优化

模拟分析.webp

3、SNP 分析

筛选遗传多态性位点,降低个体差异带来的影响

SNP分析.webp

4、组织与细胞特异性表达分析

在 Hep3B 细胞中验证表达模式

组织和细胞特异性表达分析-1.webp

组织和细胞特异性表达分析-2.webp

5、siRNA 序列设计

生成了超过 300 个候选序列

6、脱靶筛选与先导化合物筛选

基于优异性能筛选出 MED-A-0280 作为候选分子

脱靶筛选与先导化合物筛选.webp

siRNA 治疗的体外筛选能力

美迪西构建了完善的体外检测方法,用于评估 siRNA 候选分子的有效性、安全性及靶向特异性。

体外药效评价

通过系统性的体外评价策略,全面评估 GalNAc 偶联 siRNA 的药效表现,包括在多种细胞平台上的结合、摄取及基因沉默试验。

GalNAc 相关检测:
基于 SPR 和 ELISA 的 GalNAc-ASGPR1 结合分析
利用共聚焦显微镜分析 HepG2 细胞摄取
采用 FACS 分析 HepG2 细胞表面结合
通过 qPCR 测定原代肝细胞摄取

siRNA 特异性检测:
psiCHECK2 荧光素酶报告基因检测
通过 qPCR 分析细胞系及原代细胞转染效果
利用 qPCR 追踪原代细胞摄取情况
Ago2 负载实验(评估 siRNA 是否成功进入 RISC 复合体)

脱靶效应评估

采用多维度策略评估 siRNA 的脱靶效应,包括依赖于杂交和不依赖于杂交的细胞反应和毒性机制。

杂交依赖性检测:
psiCHECK2 种子序列分析
靶点敲除细胞系中的细胞毒性检测(CTG 检测)
基于 RNA-seq 和芯片的转录组分析

非依赖杂交的检测方法:
TLR3/TLR7/TLR8 细胞因子释放实验(PBMCs:ELISA/Luminex)
使用 HEK-Blue TLR 表达细胞的报告基因实验
补体激活研究
原代肝细胞及肾细胞模型中的毒性检测

案例研究:基于 iPSC 衍生神经元模型的 ASO 评估

研究目标:利用 iPSC 衍生的皮层神经元评估靶向 UBE3A 的 ASO 的疗效。

检测

ASO 治疗: 在第 14 天对神经元进行给药,并持续监测 9 天

基因表达分析: 通过 qPCR 检测到 UBE3A 表达上调,同时 UBE3A-ATS 表达下调

利用 iPSC 衍生的皮层神经元评估靶向 UBE3A 的 ASO 的疗效 检测.webp

关键结果

结果证明了 ASO 在调节神经元模型中的靶基因方面的有效性,突显了其在神经治疗应用方面的潜力。

利用 iPSC 衍生的皮层神经元评估靶向 UBE3A 的 ASO 的疗效 主要结果-1.webp

利用 iPSC 衍生的皮层神经元评估靶向 UBE3A 的 ASO 的疗效 主要结果-2.webp

赋能您的 RNAi 研究

与美迪西合作,获取以科学严谨性和丰富成功经验为支撑的创新 siRNA 解决方案。

无论您专注于治疗性药物开发还是基础研究,美迪西的 siRNA 平台都能为您提供值得信赖的研究成果。

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