美问必答 | 关于体外生物的等效性试验在新药研发中的作用

2023年8月，欧洲制药科学联合会（EUFEPS）和美国制药科学家协会（AAPS）成功举办了第五届全球生物等效性协调倡议（GBHI）会议，将世界各地的专业人士聚集一堂。本次会议针对推动全球生物等效性评估标准的协调进行深入的探讨，其中全面讨论了体外测试作为临床疗效研究替代方案的适当性和潜在益处，逐步朝着统一的生物等效性评估标准迈进。会议希望找到一种最佳的协调策略，以提高不同机构之间的一致批准率，最大限度地减少与过去批准的产品的不一致，同时降低消费者风险。

生物等效性（BE）试验对于新药研发具有重要意义，BE试验是通过研究生物利用度的方式，以药代动力学参数为指标，在相同的试验条件下比较同一种药物的不同剂型，评估其活性成分在人体中的吸收程度和速度是否存在统计学上的差异。在新药研发过程中体外BE试验的作用体现在以下几个方面：

以药代动力学作为指标，了解药物在体外环境的释放动力学，以此确保药物在患者体内达到稳定血药浓度的关键因素；帮助科研人员更好地了解药物在不同制剂中的释放速度，有助于制定更精准的给药方案，提高药物治疗的可控性和效果。

针对部分药物，比如磷结合剂或胆汁酸结合剂等，可采用体外研究如结合平衡试验和结合动力学试验作为有效性评价的方法，以代替传统的药代动力学为终点的人体生物等效性研究。

在药物设计方面，通过模拟体外环境，研究者可以观察到药物的释放速度、吸收特性以及可能的代谢途径，为药物设计和优化提供有力支持。可以设计出更为高效和便利的剂型，提高患者的依从性。

通过在早期阶段进行体外BE试验，可以更早地发现潜在的问题，减少进入临床试验阶段的失败风险，节约时间和成本。

在多年的研究服务中，美迪西CMC部门搭建了“固体制剂和液体制剂评价平台”、“眼科评价平台“、“吸入制剂评价平台”、“外用制剂评价平台”和“体外BE评价平台”。对于在胃肠道产生局部作用且无法进行体内等效性评价的药物如碳酸司维拉姆片、硫糖铝混悬液等，美迪西也拥有丰富的体外生物等效性评价经验。美迪西云讲堂特邀制剂部项目经理黄晓玉做客，为大家分享胃肠道药物体外BE项目的研究经验。以下为大家整理了直播中的对于体外BE实验的相关提问，希望能够帮助大家进一步了解和解答生物等效性实验的相关困惑。

欢迎点击直播链接，回顾黄晓玉老师的整场分享。

问：参考FDA的指南，如何理解考来烯胺（消胆胺）FDA指南中结合动力学的研究，它用的0.3和3mM的胆汁酸盐且里面都有0.1M的氯化钠？

答：这一部分是FDA指南中对于考来烯胺结合动力学的操作要求，那么，我们在试验中是需要遵循FDA指南的步骤。对于这一块个人的理解是这样的：结合动力学的试验是在模拟人体生理条件下进行的，正常人体当中胆汁酸盐的浓度是在0.3-3克/每升的范围,指南中的做法是分别按照最低的浓度和最高的浓度的胆汁酸盐下进行的。

因为消胆胺是属于高分子的季铵盐类型的离子交换树脂，作用部位在胃肠道，其他阴离子的存在可能会竞争性的影响消胆胺结合胆汁酸盐的结果。使用0.1M氯化钠是考察模拟人体生理浓度（正常人体氯离子电解质的浓度约为0.1M所以这也是对应了指南中氯化钠的浓度是0.1M）下，消胆胺在不同时间结合不同浓度胆汁酸盐的结合情况。

那么为什么会考虑是氯离子而不是其他比如说磷酸根离子等等，该方法既已是FDA指南的要求，推测肯定也是在经过一些考察与其他阴离子影响程度的大小对比过之后才定会下。

问：影响胃蛋白酶活性检测的因素有哪些？

答：首先需要考虑所购买的酶的级别。其次需要考虑酶的浓度对于酶活力的影响。对于酶反应的速率以及酶浓度来说，在一定范围内，当底物分子是足够的时候，酶的量越多，底物的转化速率越快。其他的影响因素是底物的浓度，pH值，除此之外检测方法也会对结果有影响。

问：体外BE递交资料是交到药学资料的哪个模块？

答：首先要说明，体外BE的资料不是在药学资料模块下递交，体外BE的研究资料是属于临床2.7的模块递交，最终由CDE临床模块老师进行审核。这是我们和CDE的老师沟通后确认的。

需要递交的资料目前没有明确的文件要求，但是根据我的经验至少需要以下几个：试验方法开发以及开发的报告和图谱，各个pH值条件下方法学的验证报告和图谱，以及体外BE研究的方案报告和图谱，另外NMPA发表的碳酸镧咀嚼片生物等效性研究技术指导原则中，要求提供各个试验中每个制剂单位的数据，以及统计学分析的结果。这些都是我认为至少需要必备的资料。

问：k1没有用来计算90%CI置信区间，那k1的意义是什么？

答：虽然90%的置信区间是通过k2的均值比计算的，k1没有参与计算，但是根据FDA的指南，最终需要报告k1的结果值。我理解，k1是一个亲和的常数，和结合中作用力的大小有关，并且他通过线性当做的斜率与截距的比获得的。虽然没有在90%的置信区间计算公式中，但是作为一个亲和常数，他的结果值应该在一个相对固定的范围内波动，并且这个值得大小和选择可能与选择的pH值的环境或试验参数有很大相关性，即k1的结果可能对试验条件的合理性有一定的指示作用。

问：请问体外BE要求至少几条溶曲，一定要有区分力吗？

答：从FDA个药指南看，该类药物的体外BE的研究并非都要求进行溶曲考察，目前可查到的个药指南里，醋酸钙、碳酸镧咀嚼片中有要求溶出研究，且该溶出研究是除了质量标准中规定的溶出方法（该方法用于稳定性和质量控制测定）之外，还需要提供的数据。FDA个药指南中已给出了具体的溶曲方法参数要求，咱们只需要按照这个要求去开展即可，不对是否有区分力做考虑。

关于体外BE相关的内容，您还有什么困惑和感兴趣的话题吗？欢迎在文章最后留言评论，美迪西愿与医药同行常常互通有无，共同进步与发展。