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定义:原位杂交(insituhybridization)属于分子杂交的一种,是一种将标记探针直接于组织或细胞中的待测核酸杂交,并结合免疫细胞化学的原理使用合适的检测系统,从而对目标核酸序列进行精确定量定位的方法。
发展进程:1969年Pardue和Gall最先研发了此项技术,当时可用的唯一标记物是放射性同位素,放射自显影技术显然成为探针序列检测的方法。但放射性标记探针由于安全要求措施严格、有效期短、显影时间长及放射衰变引发的低分辨率等因素,原位杂交技术的发展和应用大受限制。直至非放射性标记探针的出现,彻底排除原位杂交中遇到的种种阻碍,使得该技术得到广泛应用。
④原位PCR:是常规的原位杂交技术与PCR技术的有机结合,即通过PCR技术对靶核酸序列在染色体上或组织细胞内进行原位扩增使其拷贝数增加,然后通过原位杂交技术进行检测,从而对靶核酸序列进行定性、定位和定量分析。原位PCR技术大大提高了原位杂交技术的灵敏度和专一性,可用于低拷贝甚至单拷贝的基因定位,为原位杂交技术的发展提供了更广阔的发展前景。
以上是关于原位杂交的相关介绍,内容来源于美迪西官网。